Con la constitución Immensa aeterni establece SIXTO V, en 1588, que el Colegio Cardenalicio esté compuesto por setenta cardenales. También aumenta el número de congregaciones, y en 1589 iniciará una revisión de la Vulgata que es conocida como la “edición sextina”.

En Francia, el dirigente del partido católico no es el rey, sino ENRIQUE I duque de Guisa, hijo del conquistador de Calais. Por un momento, aventaja con mucho en poder y popularidad al débil monarca ENRIQUE III. Por ello, el rey ENRIQUE III que lo ha llamado para que asista a los Estados generales, en la fecha, aprovecha la ocasión para ordenar su muerte y apresar a muchos otros importantes nobles contrarios a la política de su gobier. El hermano de ENRIQUE de Guisa, Luis II de Lorena, también llamado cardenal de Guisa, es asesinado al día siguiente. Este hecho es considerado un auténtico ultraje entre los parientes de Guisa, y sus aliados obligarán al rey a refugiarse al lado de ENRIQUE de Navarra. ENRIQUE III es excomulgado por el Papa SIXTO V. Esto convierte a ENRIQUE III en el blanco de los extremistas católicos.

En tiempo de SIXTO V, más espectacular aún que colocar el obelisco del circo de Nerón en el centro de la Plaza de S.Pedro, es la construcción en un tiempo record -sólo 18 meses cuando en realidad se han previsto varios años- de la cúpula de S.Pedro, por obra del arquitecto Giacomo Della Porta, quien concluye la obra en 1589 sobre la base del proyecto de Miguel Ángel.

Desde el año 498, el Papa Gelasio I había creado la Capilla de la Basílica de San Pedro con un coro de cantantes. En 1480, Sixto IV crearía la Capilla Vaticana que Julio II renovaría en 1512 denominándola Capilla Julia (Cappela Giulia). Los sucesivos Papas irían introduciendo modificaciones en su constitución aumentando el número de capellanes cantores hasta que en 1590 SIXTO V fundió las capillas en una sola que desde entonces se conoce con el nombre de Capilla Sixtina que llegó a tener 30 capellanes y 10 discípulos bajo la dirección del maestro holandés Giacomo Ardradelt.

Fallece el papa SIXTO V. Reorganizó las finanzas y la economía de los Estados pontificios, fija el colegio cardenalicio en 70 miembros y refuerza la aplicación de las conclusiones del concilio de Trento. Con su muerte acaba la serie de Papas estrictamente reformistas. Las profecías de San Malaquías se refieren a este papa como Axis in medietate signi (El hacha en medio del signo), cita que hace referencia a que en su escudo de armas figuraba un hacha cruzada sobre un león y a que el León es un signo del Zodiaco.